Em meados do século XVI, Cosme I de Médici decidiu construir um edifício que reunisse os escritórios públicos do Grão-Ducado num único complexo.
Mesmo depois de o edifício ter sido convertido em museu, o nome "Ufizi" (escritório) permaneceu no edifício. Em 1559, o projeto do edifício foi confiado a Giorgio Vasari, pintor, historiador de arte e um dos melhores arquitetos e urbanistas da época.
Foi possível adquirir grandes terrenos comprando todas as casas entre a Piazza della Signoria e o rio Arno. O complexo também incluía a antiga igreja de San Piero Schiraggio, cujos vestígios ainda hoje se encontram na área.
Existem absides no exterior, no lado da Via della Ninna, e no interior do edifício.
Em 1565, a fábrica estava quase concluída, a ponto de já terem sido construídos o longo "corredor" vasariano que, cruzando o Arno pela Ponte Vecchio, liga a Galeria Uffizi ao Palácio Pitti, e a passagem aérea que, contornando a Via della Ninna, conduz ao Palazzo Vecchio.
A construção de Vasari é composta por três alas que circundam um grande quadrado com três fileiras de pórticos.
O pórtico se abre para o Arno com uma magnífica e pitoresca arcada na parte traseira. A arquitetura do edifício é inspirada na combinação tradicional de gesso branco e na alternância de claro e escuro, cheio e vazio, e no cinza da pietra serena. No edifício Uffizi, Vasari aplicou principalmente os módulos de Michelangelo encontrados na sala da Biblioteca Laurentiana, projetada por Buonarroti em 1524.
De fato, esse modelo é claramente reproduzido no longo pátio que, do lado de fora, reproduz o sistema de membros de pedra pietra serena idealizado por Michelangelo para a Biblioteca Laurentiana. Ao inserir o complexo Uffizi, num estilo novo e totalmente renascentista, no contexto medieval do centro histórico florentino, Vasari também se preocupou em não perturbar o harmonioso tecido urbano da cidade, que remonta ao século XIII, procurando acima de tudo criar uma maravilhosa abertura cênica para a volumosa massa do Palazzo Vecchio.
O sucessor de Cosme, Francesco I, um estudioso de ciências e artes, decidiu renovar a loggia que coroava o edifício, a fim de destinar algumas salas para suas coleções de objetos de arte, armas, curiosidades científicas e laboratórios.
Em 1580, a obra foi confiada a Bernardo Buontalenti, que simultaneamente iniciou a construção do Teatro Granducal no segundo andar (onde hoje se encontra o Gabinete de Desenhos e Gravuras) e da Tribuna no segundo andar, destinada a abrigar as melhores peças da coleção Medici.
Em 1586, toda a transformação estava quase concluída. Em pouco tempo, todas as obras distribuídas entre o Palazzo Vecchio e o Palazzo Medici, pertencentes a Cosme, o Velho, Lorenzo, o Magnífico, e Cosme I, pai de Francesco, foram reunidas nas novas salas.
Ao primeiro núcleo de obras, que já incluía obras-primas de Sandro Botticelli, Paolo Uccello e Filippo Lippi, foram acrescentadas outras pinturas e esculturas ao longo dos séculos, graças ao interesse apaixonado dos sucessores de Francesco I. Fernando I mandou transferir para os Uffizi todas as obras que tinha colecionado em Roma na Villa Medici.
O Corredor de Vasari, na Galeria Uffizi, em Florença, foi construído por Giorgio Vasari em 1565, a p...
Em 1631, Fernando II colocou ali um importante conjunto de pinturas, incluindo obras de Piero della Francesca, Ticiano e Rafael, obras que haviam sido legadas à sua esposa Vittoria della Rovere pelos duques de Urbino.
Em 1675, a Galeria Uffizi foi enriquecida pela coleção do cardeal Leopoldo de Médici, que incluía alguns retratos e o primeiro núcleo da coleção de desenhos. Cosme III colecionava pedras preciosas, medalhas e moedas e trouxe de Roma a famosa Vênus, mais tarde chamada de "dei Medici", o Arrotino, os Lottatori e outras esculturas antigas notáveis.
Anna Maria Lodovica, Eleitora Palatina e última herdeira dos Médici, que já havia ampliado a valiosa coleção com pinturas flamengas e alemãs, doou toda a coleção ao Estado da Toscana em seu testamento (1743), com a condição de que todas as obras permanecessem em Florença.
Os Lorraines, continuando a tradição dos Medici, também contribuíram para aumentar o patrimônio artístico da galeria: Francesco doou esculturas e moedas antigas, enquanto Pietro Leopoldo, além de reunir as obras pertencentes aos Medici ainda dispersas entre Florença e Roma, mandou transportar da Villa Medici, em Roma, o grupo Niobe e Niobidi, para o qual mandou construir uma sala especial em 1780.
A Pietro Leopoldo também é atribuída a iniciativa de reorganizar a galeria de acordo com critérios museográficos modernos e de abri-la ao público. No século XIX, quando vários museus especializados foram criados em Florença (o Museu Arqueológico, o Museu Nacional Bargello, o Museu San Marco, etc.), a Galeria Uffizi perdeu parte de suas coleções.
Parte do edifício foi destinada a abrigar os Arquivos do Estado em 1852 e, no final do século, o teatro foi destruído para dar lugar a mais salas. Em meados do século XIX, o exterior do edifício sofreu algumas transformações: foram abertos nichos nas colunas do pórtico da praça, onde foram colocadas estátuas representando ilustres toscanos, executadas por escultores da época, como Giovanni Dupré e Lorenzo Bartolini.
Quanto ao presente, duas iniciativas importantes merecem destaque: a recente reabertura do Corredor Vasariano, no qual obras dos séculos XVII e XVIII foram dispostas juntamente com a notável coleção de autorretratos, e a criação de uma seção educacional destinada principalmente à organização de programas de estudo e visitas guiadas para estudantes.