Wejście znajduje się w trzecim korytarzu, pomiędzy salą 25 a salą 34. Korytarz, który przecina rzekę Arno nad Ponte Vecchio, łącząc Uffizi i Palazzo Vecchio z Palazzo Pitti, został zlecony Vasariemu przez Cosimo I de' Medici i ukończony w bardzo krótkim czasie, w ciągu pięciu miesięcy, w 1565 roku.
Został poważnie uszkodzony podczas II wojny światowej i ponownie otwarty dla zwiedzających dopiero w 1973 roku. Trasa biegnie przez prawie kilometr, a okna i „oczy”, które otwierają się wzdłuż jej przebiegu, oferują zwiedzającym sugestywne widoki na miasto, rzekę i Ponte Vecchio. Jedno z okien, niedawno ponownie otwarte, wychodzi na wnętrze kościoła Santa Felicita w dzielnicy Oltrarno i wydaje się, że z tego samego miejsca wielcy książęta uczestniczyli w mszy świętej.
W korytarzu Vasariego znajduje się wiele dzieł z XVII i XVIII wieku. W pierwszych salach można podziwiać znane obrazy malarzy karavaggeskich, m.in. Gherardo delle Notti z obrazami „Szczęście”, „Toast na Olimpie” i „Wieczerza z lutnistą”; Rutilio Manetti, Francesco Rustici z obrazem „Malarstwo i architektura”; Artemisia Gentileschi z obrazem „Judyta i Holofernes” oraz Guido Reni.
Następnie znajdują się dzieła XVII-wiecznych malarzy włoskich, od Annibale Carracci po Guido Reni z obrazem „Śpiący Endymion”. Długi korytarz mieści XVII-wieczne obrazy włoskie, podzielone według miast; są wśród nich „Święta rozmowa” Giovan Battisty Crespiego, „Sybilla Samia” Guercino oraz „Portret kardynała Agucchii” Domenichino. Znajdują się tu również dzieła szkoły neapolitańskiej, w tym Salvator Rosa, Battistello Caracciolo, Cerquozzi i Giuseppe Recco z jednym ze swoich martwych natur, wspaniały Jarmark w Poggio a Caiano Giuseppe Maria Crespiego, putti in volo Giovan Battista Tiepolo, a na końcu kilka płócien Rosalby Carriery i Pompeo Batoniego.
Najsłynniejsza część korytarza Vasariego to ta poświęcona niezwykłej kolekcji autoportretów z różnych epok, zarówno włoskich, jak i zagranicznych. Wśród włoskich artystów znajdują się Leonardo, Vasari, Agnolo, Taddeo i Gaddo Gaddi, Romanino, Andrea del Sarto, Bronzino, Tycjan, Jacopo Bassano, Palma il Giovane, Veronese i wielu innych. Trasę zwiedzania zamyka kolekcja ikonograficzna zawierająca portrety znanych postaci z różnych epok.