Drugi korytarz łączy dwa skrzydła budynku. Z dużych bocznych okien po lewej stronie można podziwiać wspaniały widok na dzielnicę Oltrarno we Florencji, wzgórza z bielonymi fasadami San Miniato, Forte Belvedere i rzekę Arno, którą po prawej stronie przecina Ponte Vecchio.
Po przeciwnej stronie można podziwiać wyjątkową perspektywę placu Uffizi, a w tle Piazza della Signoria z potężną bryłą Palazzo Vecchio. W pierwszej części korytarza sufit zdobi wspaniała XVII-wieczna dekoracja w kształcie altany. Podobnie jak w pierwszym korytarzu, znajduje się tu wiele cennych rzeźb klasycznych.
Na szczególną uwagę zasługują okrągły ołtarz, ozdobiony płaskorzeźbą przedstawiającą Ofiarę Ifigenii, przykład sztuki neoattycznej z I wieku p.n.e.; spinarius, rzymska kopia greckiego oryginału z brązu z II-I wieku p.n.e.; Wenus w łaźni, kopia greckiego oryginału autorstwa Doidalsasa z III wieku p.n.e.; wspaniała Siedząca dziewczyna przygotowująca się do tańca, kopia hellenistycznego oryginału z III wieku p.n.e.; oraz dwie postacie odpoczywających rzymskich dam.